Page 9 - Edicion 3662
P. 9

bodegas y/o colleiteiros de esta D.O.P. Las  produce un enriquecimiento de la fase móvil en
           muestras eran de vinos ya embotellados o reco-  el componente orgánico, siendo éste una mez-  4ENOLOGÍA
           gidas en depósitos en las distintas bodegas. En  cla al 50% de metanol y acetonitrilo. La fase
           total se recopilaron 219 muestras de vino: 162  acuosa era una disolución tampón de acetato
           blancos y 57 tintos procedentes de las campa-  de sodio a un pH de 6.6.
           ñas comprendidas entre 2017 y 2022.
                                                  Control microbiológico de los vinos:
           Parámetros químicos básicos de los vinos:  Para la detección de la presencia de levaduras
           Los parámetros químicos básicos de los vinos  y/o bacterias se filtraron 50 mL a través de una
           (pH, grado alcohólico, acidez total, acidez volá-  membrana de 0,22 μm utilizando un equipo de
                                                              TM
           til, ácidos láctico, málico y tartárico y glicerol)  filtración Milliflex (Millipore). La membrana se
           se determinaron mediante FTIR (Espectrosco-  incubó sobre medio Wallerstein Nutrient Broth
           pia de infrarrojo por transformadas de Fourier)  (Millipore) a 28ºC durante 2-4 días, hasta la
           utilizando un equipo Bacchus II (TDI, Barcelo-  aparición de colonias visibles. En las muestras
           na, España) según las directrices de la Resolu-  que mostraron crecimiento se contó el número
           ción OIV/OENO 390/2010, empleando los  de colonias y los datos se expresaron en unida-
           métodos de referencia de la OIV (2021) para la  des formadoras de colonias por mL (UFC/mL).
           realización de ajustes de calibración y verifica-  La diferenciación entre levaduras y bacterias se
           ción. Los azúcares se determinaron utilizando  hizo en base a la morfología de las colonias y
           un analizador secuencial LISA 200 (TDI, Bar-  mediante observación en un microscopio ópti-
           celona, España) (método enzimático-espectro-  co con contaste de fases Nikon ECLIPSE E400.
           fotométrico), técnica basada en el método ofi-  Para la detección de Brettanomyces se uti-
           cial de la OIV (2021). Para la cuantificación de  lizó el medio de cultivo selectivo KITBRETT
           SO libre y total se utilizó la técnica FCS emple-  Vivelys (AZ3oeno) en el que se sembraron
             2
           ando un equipo de macroflujo AA3 de Seal  directamente 0,5 mL de vino. Las placas se
           Analytical (AxFlow, Madrid, España), siguiendo  incubaron a 28ºC durante un período de entre
           las instrucciones de la Resolución OIV/OENO  5-10 días y se procedió al recuento de colonias.
           391/2010 y verificando el método con los pro-  Además del crecimiento selectivo, este medio
           tocolos de referencia de la OIV (2021).   contiene un precursor aromático que permite
                                                  detectar el olor característico a fenol/animal ori-
           Determinación de aminas biógenas:      ginado por acción de la levadura. La presencia
           La concentración de las principales aminas bió-  por encima de 1000 UFC/mL en un vino indica
           genas encontradas en los vinos se cuantificó  un posible riesgo de alteración por Brettanomy-
           mediante HPLC utilizando un equipo 1260 Infi-  ces. Este estudio solo se llevó a cabo en los
           nity (Agilent Technologies Spain, Madrid, Espa-  vinos tintos.
           ña). La inyección de la muestra de vino se llevó
           a cabo previa derivatización in situ con OPA,  Resultados y discusión
           para facilitar una mejor separación y garantizar  Caracterización química básica de los vinos:
           la detección de los compuestos derivatizados  Las características básicas de los vinos analiza-
           empleando un detector de fluorescencia. Se  dos se muestran en la Tabla 1. Los valores de
           cuantificó la histamina, tiramina, feniletilamina,  acidez total y ácido tartárico, grado alcohólico
           putrescina y cadaverina mediante la genera-  eran similares entre vinos blancos y tintos
           ción de una recta de calibrado utilizando patro-  mientras que la media de acidez volátil, glicerol  4 SeVi nº 3.662 4 11 de mayo de 2024
           nes externos en concentraciones que cubren el  y pH era mayor en los tintos. Estos últimos tam-
           rango de valores habituales para estas aminas  bién presentaban mayor contenido de ácido
           en vino. En cuanto al método cromatográfico,  láctico y menor de ácido málico, como era de
           se trabajó en fase reversa a un flujo constante  esperar, ya que la fermentación maloláctica es
           de 0,3 mL/min y con un gradiente en el que se  una práctica habitual en la elaboración de vino  517
   4   5   6   7   8   9   10   11   12   13   14